LAPORAN PRAKTIKUM Hemoglobin Darah

A.   Judul                       : Pemeriksaan Hemoglobin Darah

B.   Tujuan                               : Untuk mengetahui kadar hemoglobin

C. Tanggal Praktikum : 17 Maret 2012

D. Waktu                        : 2 x 45 menit

E.   Landasan Teori

                       Hemoglobin adalah molekul protein pada sel darah merah yang berfungsi sebagai media transport oksigen dari paru paru ke seluruh jaringan tubuh dan membawa karbondioksida dari jaringan tubuh ke paru paru. Kandungan zat besi yang terdapat dalam hemoglobin membuat darah berwarna merah.

         Kadar hemoglobin dapat ditetapkan dengan berbagai cara, antara lain metode Sahli, oksihemoglobin atau sianmethhemoglobin.

Dasar Penetapan

·         Penetapan Hb metode Sahli didasarkan atas pembentukan hematin asam setelah darah ditambah dengan larutan HCl 0.1N kemudian diencerkan dengan aquadest. Pengukuran secara visual dengan mencocokkan warna larutan sampel dengan warna batang gelas standar. Metode ini memiliki kesalahan sebesar 10-15%, sehingga tidak dapat untuk menghitung indeks eritrosit.

Penetapan kadar Hb metode oksihemoglobin didasarkan atas pembentukan oksihemoglobin setelah sampel darah ditambah larutan Natrium karbonat 0.1% atau Ammonium hidroksida. Kadar Hb ditentukan dengan mengukur intensitas warna yang terbentuk secara spektrofotometri pada panjang gelombang 540 nm. Metode ini tidak dipengaruhi oleh kadar bilirubin tetapi standar oksihemoglobin tidak stabil.

 Metode sianmethemoglin didasarkan pada pembentukan sianmethemoglobin yang intensitas warnanya diukur secara fotometri. Reagen yang digunakan adalah larutan Drabkin yang mengandung Kalium ferisianida (K3Fe[CN]6) dan kalium sianida (KCN). Ferisianida mengubah besi pada hemoglobin dari bentuk ferro ke bentuk ferri menjadi methemoglobin yang kemudian bereaksi dengan KCN membentuk pigmen yang stabil yaitu sianmethemoglobin. Intensitas warna yang terbentuk diukur secara fotometri pada panjang gelombang 540 nm.

Selain K3Fe[CN]6 dan KCN, larutan Drabkin juga mengandung kalium dihidrogen fosfat (KH2PO4) dan deterjen. Kalium dihidrogen fosfat berfungsi menstabilkan pH dimana rekasi dapat berlangsung sempurna pada saat yang tepat. Deterjen berfungsi mempercepat hemolisis darah serta mencegah kekeruhan yang terjadi oleh protein plasma.

            Nilai Rujukan.

Ø  Bayi baru lahir            : 15.2 - 23.6 gr/dl

Ø  Anak usia 1-3 tahun   : 10.8 - 12.8 gr/dl

Ø  Anak usia 4-5 tahun   : 10.7 - 14.7 gr/dl

Ø  Anak usia 6-10 tahun : 10.8 - 15.6 gr/dl

Ø  Dewasa (Pria)             : 13.2 - 17.3 gr/dl

Ø  Dewasa (Wanita)       : 11.7 - 15.5 gr/dl

F.   Alat dan Bahan

Alat :

v Blood lanset (alat penusuk)

v  Standart warna

v  Selang penghisap

v  Tabung hemoglobin

v Bengkok

v Cucing

v Pipet hemoglobin

v Pembersih tabung

v Pengaduk tabung

Bahan :

v  Aquades

v  HCl 0,1 N

v Alkohol 70%

v Kapas

G. Langkah Kerja

1.     Siapkanlah alat dan bahan yang akan digunakan

2.     Isilah tabung pengencer (tabung sahli) dengan HCl 0,1 N sampai tanda batas 2 ( 20 mm³⁾

3.     Lakukanlah persiapan pengambilan darah ,dengan menyiapkan blood lanset  dan kapas alkhohol

4.     Desinfeksi ujung jari yang akan di infeksi ujung darahnya dengan menggunakan kapas alkohol.

5.     Siapkanlah tabung hemoglobin,selanjutnya  rangkailah selang  dan pipet runcing dengan posisi selang diatas dan pipet yang dibawah

6.     Kondisikanlah pasien dalam keadaan lemas

7.     Tusuk ujung jari tersebut dan biarkan darah keluar terlebih dahulu, setelah itu hisap darah yang keluar dengan menggunakan pipet kapiler sampai batas berwarna biru atau sebanyak ± 20 mm³.

8.     Pindahkan darah tersebut kedalam tabung yang berisi HCL dan tunggu sampai bereaksi dan tercampur

9.     Encerkan sampel darah tersebut dengan meneteskan aquades sambil dikocok secara perlahan dengan menggunakan pengaduk gelas sampai warna darah dalam tabung sama dengan cairan pada tabung standar.

10.              Setelah warna sampel darah sama dengan warna standar, bacalah skala yang di tunjukan pada tabung pengencer, sehingga di dapatkan konsentrasi hemoglobin dari sampel darah yang diambil.

H. Hasil Tes

NO	NAMA	LARUTAN HCL         (µL)	KADAR HB (gr/dl)	KETERANGAN
1	DEWI CITRA MARIA	20	13	NORMAL

I. Kesimpulan

  Ø      Hemoglobin adalah molekul protein pada sel darah merah yang berfungsi sebagai media transport oksigen dari paru paru ke seluruh jaringan tubuh dan membawa karbondioksida dari jaringan tubuh ke paru paru. Kandungan zat besi yang terdapat dalam hemoglobin membuat darah berwarna merah. Kadar hemoglobin dapat ditetapkan dengan berbagai cara, antara lain metode Sahli, oksihemoglobin atau sianmethhemoglobin

      Ø      Kadar Hb normal

 Bayi baru lahir         :15.2 - 23.6 gr/dl

 Anak usia 1-3 tahun      : 10.8 - 12.8 gr/dl

 Anak usia 4-5 tahun      : 10.7 - 14.7 gr/dl

 Anak usia 6-10 tahun    : 10.8 - 15.6 gr/dl

 Pada dewasa (Pria)        : 13.2 - 17.3 gr/dl

 Pada dewasa (Wanita)   : 11.7 - 15.5 gr/dl